Pullulanase/Limit-dextrinase - Dosage des activités enzymatiques
Référence : K-PULLG6
Le test PullG6 pour la mesure de la pullulanase utilise un substrat soluble dans l'eau, à savoir le 4,6-O-benzylidène-4-nitrophényl-63-α-D-maltotriosyl-maltotriose (BPNPG3G3), couplé aux enzymes auxiliaires α-glucosidase et β-glucosidase.
Après hydrolyse du substrat à1,6-α par pullulanase ou limit-dextrinase, le 4-nitrophényl-β-maltotrioside libéré est immédiatement hydrolysé au glucose et au 4-nitrophénol par l'action concertée de l'α-glucosidase et β-glucosidase dans le mélange réactif.
La réaction est terminée et les ions phénolate sont développés par addition d'alkali dilué.
L'absorbance est lue à 400 nm et la valeur obtenue correspond directement à l'activité pullulanase.
Note : PNP = 4-nitrophenol
Température de livraison : ambiante
Température de stockage :
- Stabilité à court terme: 2-8°C
- Stabilité à long terme: voir les étiquettes de chaque composant
Format de dosage : spectrophotomètre
Méthode de détection : absorbance - 400
Réponse du signal : croissance
Temps de réaction : 10 min pour les préparations à la pullanase / 30 min pour les extraits de malt contenant de la Limit-dextrinase
Limite de détection : 0,18 U/ml pour les préparations pullulanase (dilution de 50 fois) / 0,01 U/g pour la limit dextrinase dans le malt moulu
Reproductibilité (%) : ~ 3%
Stabilité : > 2 ans dans les conditions de stockage recommandées
Nouvelle méthode
- Haute sensibilité
- Méthode de référence car la structure du substrat est définie
- Stable + de 1 an après préparation des réactifs
- Adaptable en manuel et automate
- 1 contrôle inclus dans le kit
- Reproductible
- Pas de problématique de transglycosilation
- Pas de changement, variation entre les lots
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Spécifications
Référence | Conditionnement | |
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K-PULLG6 | 100/200 tests (selon méthode/according to method) |